PHA淋巴細胞轉化試驗概述

PHA淋巴細胞轉化試驗是T淋巴細胞與有絲分裂原在體外共同培養(yǎng)時，受到后者的刺激可發(fā)生形態(tài)學和生物化學的變化，部分小淋巴細胞轉化為不成熟的母細胞，并進行有絲分裂的試驗方法。

• 檢查部位 其他
• 科室 腫瘤科
• 相關疾病 小兒藥物性腎損害 小兒紫斑濕疹綜合征
• 相關癥狀 麻風恐怖

PHA淋巴細胞轉化試驗正常值

• 計數(shù)淋巴細胞200個，識別淋巴母細胞(超過正常淋巴細胞2～4倍，核膜清晰，核染質疏松而成細網(wǎng)狀，核仁明顯，胞漿豐富，呈嗜堿性)、過渡型淋巴細胞(體積變化不大，僅為上述明顯核變化)、小淋巴細胞(體積稍大于紅細胞，核染質致密，無核仁)，統(tǒng)計其轉化率。皮膚科轉化率正常值大于58%。 

PHA淋巴細胞轉化試驗臨床意義

• PHA淋巴細胞轉化率下降，是細胞免疫功能降低的反應。此項檢查，皮膚科多用于疾病分型(如麻風)、病情判斷(如皮膚惡性腫瘤)、藥物療效觀察，以及某些免疫缺陷性和變態(tài)反應性皮膚病的研究。
  異常結果
  免疫功能降低引發(fā)的各種癥狀。
  需要檢查的人群疑似麻風、皮膚惡性腫瘤癥狀的病人。 

PHA淋巴細胞轉化試驗檢查方法

• 操作方法：
  1.取無菌肝素抗凝血0.lml，加入1.8ml細胞培養(yǎng)液中，同時加入1 000μg/m1 PHA 0.1m1，對照管不加PHA，將細胞置37℃、5%CO2培養(yǎng)3d，每天搖動1次。
  2.培養(yǎng)結束時吸棄大部分上清液，加入8.5g/L NH4Cl 4ml混勻，置37℃水浴10min。
  3.2500r/min離心10min，棄上清液，沉淀加5ml固定液，室溫作用5min。
  4.2500r/min離心10min，棄上清液，留0.2ml沉淀細胞制片，迅速吹干。
  5.吉姆薩染液染色 10～20min，水洗，干燥。
  6.油鏡計數(shù)200個淋巴細胞中轉化的細胞數(shù)，計算轉化率。
  結果判斷：
  1.淋巴母細胞的形態(tài)學標準：細胞核的大小、核與胞漿的比例、胞漿染色性及核的構造與核仁的有無。
  ⑴成熟的小淋巴細胞：與未經(jīng)培養(yǎng)的小淋巴細胞大小一樣，為6～8μm，核染色致密，無核仁，核與胞漿比例大，胞漿染色為輕度嗜堿性。
  ⑵過渡型淋巴細胞：比小淋巴細胞大，約10～20μm，核染色致密，但出現(xiàn)核仁，此為與成熟小淋巴細胞鑒別要點。
  ⑶淋巴母細胞：細胞體積增大，約20～30μm，形態(tài)不整齊，常有小突出，核變大，核質染色疏松，有核仁1～2個，胞漿變寬，常出現(xiàn)胞漿空泡。
  ⑷其它細胞：如中性粒細胞在培養(yǎng)72h后，絕大部分衰變或死亡呈碎片。
  2.淋巴細胞轉化率的計算 按上述分類檢查推片頭、體、尾三部分，計數(shù)200個淋巴細胞，算出百分率。轉化的淋巴細胞包括淋巴母細胞和過渡型淋巴細胞，未轉化的淋巴細胞指的是成熟的小淋巴細胞。在正常情況下，PHA誘導的淋巴細胞轉化率為60～80%，如為50～60%則偏低，50%以下則為降低。
  再根據(jù)結果得出正確的判斷。 

PHA淋巴細胞轉化試驗注意事項

• 1.培養(yǎng)基成分對轉化率影響較大，注意其有效期。
  2.小牛血清用前需滅活。
  3.培養(yǎng)時要保證有足夠的氣體，一般10ml培養(yǎng)瓶內(nèi)液體總量不要超過2ml。
  4.PHA劑量過大對細胞有毒性，太小不足以刺激淋巴細胞轉化，試驗前應先測定PHA轉化反應劑量。
  5.實驗中要嚴格無菌操作，防止污染。
  檢查前禁忌：注意健康的飲食，保持良好的心情。
  檢查時要求：積極配合醫(yī)生。